Действующие вещества
Оглавление
- Систематика и культурально-морфологическая характеристика
- Депонирован
- Систематическое положение
- Культурально-морфологическая характеристика
- Физиолого-биохимические признаки
- Источники энергии
- Условия роста и развития
- Питательные среды
- Действие на вредные организмы
- Механизм действия
- Симптомы повреждения
- Подавляемые виды возбудителей
- Резистентность
- Профилактика резистентности
- Фитотоксичность
- Действие на растения
- Применение
- Токсикологические свойства и характеристики
- Раздражающее действие
- Нормирование остаточных количеств
- Класс опасности
- Производство и хранение
- Производство
- Хранение
Систематика и культурально-морфологическая характеристика
Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 – штамм микроскопического гриба Trichoderma asperellum, обладающий антагонистической активностью по отношению к фитопатогенным грибам и бактериям[5].
Депонирован
в Биоресурсном Центре Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (БРЦ ВКПМ), ФГБУ ГосНИИгенетика, под регистрационным номером F-1395 25 июля 2017 года[3].Данный штамм обнаружен в естественных условиях в почве республики Татарстан на территории ООО Тепличный Комбинат «Майский». Хранится в музее лаборатории сельскохозяйственной биохимии и биотехнологии Института фундаментальной медицины и биологии Казанского (Приволжского) федерального университета, г. Казань и в БРЦ ВКПМ, ФГБУ ГосНИИгенетика, г. Москва[3].
Систематическое положение
: домен Эукариоты (Eukaryota), царство Грибы (Fungi), тип Аскомицеты (Ascomycota), класс Эуаскомицеты (Euascomycetes) или Sordariomycetes, порядок Гипокрейные (Hypocreales), семейство Hypocreaceae, род Trichoderma. Род Trichoderma – анаморфа рода Hypocrea[1].Культурально-морфологическая характеристика
. На питательной среде Чапека колонии штамма Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395, при температуре +28°С растут быстро, достигая из центра до краев чашки Петри диаметром 100 мм за 4–5 суток[3].Во время роста формируется до пяти концентрических колец, с характерным интенсивным спороношением. Появление спороношения фиксируется на 4–6 сутки роста. В центре колонии концентрические кольца более темные. Обратная сторона колонии слабожелтая или бесцветная. Пигмент в питательную среду не выделяется. Экссудат чаще отсутствует. Запах грибной, слабый[3].

Мицелий стелющийся, паутинистый. Цвет – от зеленого до темно-желтого. Гифы гладкие, бесцветные, в диаметре 2–4 мкм, со вздутиями и толстостенными клетками[3].
Хламидоспоры сферические или яйцевидные, интеркалярные, терминальные, гладкие, бледно-зеленые, от 4,5 до 15,0 мкм в диаметре[3].
Спорангиеносцы прямые, бутылевидные, древовидно-разветвленные, чаще формируются в подушечках и редко в воздушном мицелии. Спорангиеносцы симметричные и завершаются двумя или более фиалидами. Ширина преимущественно от 2,8 до 4,0 мкм[3].
Конидии – темно-зеленые, от шаровидных до сферических, или яйцевидных, мелко-шиповатые, размер 3,4–3,6 на 3,0–4,0 мкм[3].
Физиолого-биохимические признаки
Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 – аэроб.
Источники энергии
. Характеризуется следующими свойствами:- по отношению к источникам углерода: хорошо усваивает глюкозу, крахмал; растет на средах, содержащих галактозу, лактозу, сахарозу, крахмал; не усваивает целлюлозу и хитин;
- по отношению к источникам азота: усваивает органический азот и аммонийные формы азота; восстанавливает нитраты[3].
Условия роста и развития
. Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 способен расти в интервале значений pH от 2,5 до 9,5. Оптимальные условия развития pH 5,0–6,0. В более кислых (pH 2,5–5,0) и в более щелочных (pH 7,0–9,5) условиях изменяются морфологические характеристики культуры – замедляется спорообразование[3].Питательные среды
. Штамм культивируют на плотных питательных средах: суслоагар, агар, среда Чапека, SNA.Оптимальная температура для роста +26°C– +28°C. Длительность культивирования до массовой споруляции – от 4 до 6 суток, в зависимости от состава среды и температуры культивирования[3].
Действие на вредные организмы
Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 – продуцент гидролитического комплекса, обладающий целлюлазной (1,37 МЕ/мл) активностью, ксиланазной (335 МЕ/мл) активностью, фитотоксической активностью для улучшения всхожести семян, фунгицидной активностью[3].
Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395, как и все грибы рода Trichoderma, подавляют жизнедеятельность фитопатогенных грибов. Механизм отрицательного типа взаимодействия грибов рода Trichoderma с фитопатогенными микроорганизмами изучен недостаточно. Предполагается, что биологическое регулирование численности фитопатогенов происходит косвенно:
- за счет конкуренции за питательные вещества и пространство;
- в результате способности синтезировать и(или) сопротивляться метаболитам, препятствующим прорастанию спор фитопатогена;
- в результате способности к уничтожению клеток фитопатогена;
- в результате способности модифицирования ризосферы – закисление почвы таким образом, что фитопатогены перестают расти[1].
Кроме того, биологический контроль численности может быть следствием прямого взаимодействия между фитопатогенами и штаммами Trichoderma Asperellum, как в микропаразитизме, возникающем при физическом контакте или синтезе гидролитических ферментов, так и за счет токсичных соединений и (или) антибиотиков, действующих синергетическим путем совместно с ферментами[1].
Механизм действия
. Согласно классификации FRAC, Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395, как и все грибы рода Trichoderma, относится к группе фракций BM Biologicals with multiple modes of action/ Биологические препараты с несколькими механизмами действия. Группа ВМ02: Микробиологический (живые микробы, или экстракты из микробов, или метаболиты). Химическая группа: грибы род Trichoderma[7].Механизм действия биологических препаратов этой группы включает различные способы влияния на фитопатогенные организмы: конкуренция, микопаразитизм, антибиотикоз, разрушение мембран фунгицидными липопептидами, литическими ферментами, индуцированная защита растений. При этом отмечается, что биологический препарат, входящий в группу ВМ02 может обладать, как всеми указанными способами влияния, так и только некоторыми из них[7].
Симптомы повреждения
. Рост и развитие фитопатогенов подавляется через 12–24 часа после применения[3].Подавляемые виды возбудителей
. Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 эффективен против широкого спектра заболеваний зерновых культур, томатов и огурцов закрытого грунта, гороха, сои, картофеля, капусты, вызываемых грибами родов: Fusarium, Puccinia, Septoria, Helminthosporium, Erysiphe, Alternaria, Phoma, Phytophthora, Scolecotrichum, Rhizoctonia, Plasmodiophora. Данный штамм патогенен для бактерий родов Xanthomonas, Pseudomonas[3].Примерный перечень болезней и возбудителей представлен в списке "Подавляемые болезни и виды возбудителей", расположенном справа.
Резистентность
. До настоящего времени не было обнаружено случаев формирования резистентных популяций как к Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395, так и к другим видам грибов рода Trichoderma[7].Профилактика резистентности
. Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395, как и другие биопрепараты, относящиеся к классам FRAC с кодами BM01 и BM02, можно использовать в рекомендованных производителем эффективных дозах без опасности возникновения резистентности. Ограничений в отношении количества применений, количества сроки или последовательность применения при условии, что они соответствуют маркировке производителя и местным нормативным требованиям, нет[7].Кроме того, препараты с действующим веществом Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395, как и другие биопрепараты, относящиеся к классам FRAC с кодами BM01 и BM02, рекомендуется использовать для замены препаратов с другими действующими веществами с целью профилактики возникновения резистентных популяций фитопатогенных организмов[7].
Фитотоксичность
Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 не проявляет[1][3].Подавляемые болезни и виды возбудителей:
- альтернариоз картофеля – Alternaria solani;
- аскохитоз гороха – Ascochyta pisi;
- бактериальное увядание подсолнечника – Pseudomonas solanacearum;
- гельминтоспориозно-фузариозные корневые гнили зерновых – род Fusarium, Blumeria graminis, род Puccinia, род Septoria;
- кила капусты – Plasmodiophora brassicae;
- корневые гнили огурцов – Fusarium solani, Pythium ultimum, Rhizoctonia solani, Thanatephorus cucumeris;
- корневвая гниль пшеницы – Rhizoctonia solani;
- мучнистая роса зерновых культур – Blumeria graminis;
- плесневение семян;
- ржавчина гороха – Uromyces pisi, U. fabae;
- ржавчина бурая листовая пшеницы – Puccinia recondita,
- ржавчина бурая листовая ржи – Puccinia dispersa;
- ржавчина сиеблевая (линейная) зерновых – Puccinia graminis;
- септориоз колоса злаковых культур – Septoria nodurum;
- септориоз листьев пшеницы – Septoria tritici;
- серая гниль капусты – Botrytis cinerea;
- склеротиниоз – Sclerotinia borealis;
- сосудистый бактериоз крестоцветных культур – Xanthomonas campestris;
- фитофтороз томатов – Phytophthora infestans de Bary A.
- фомоз рапса – Phoma lingam;
- фузариоз колоса злаковых культур – Fusarium culmorum[3].
Действие на растения
Установлено, что Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395, благотворно влияет на рост и развитие растений, в частности на всхожесть семян[1][3].
Как и прочие виды рода Trichoderma, данный штамм способен защищать растения от действия патогенов не только путем подавления фитопатогенных микроорганизмов, но и путем индуцирования системной и локальной резистентности растений[1].
Фитотоксическая активность штамма Trichoderma asperellum F-1395 способствует увеличению всхожести семян зерновых, зернобобовых, овощных, декоративных и сорных культур в 1,5 раза[3].
Применение
Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 используют в качестве действующего вещества фунгицида (Фитотрикс, Ж ), применяемого для борьбы с широким спектром фитопатогенных организмов:
- на пшенице яровой – против гельминтоспориозной корневой гнили и фузариозной корневой гнили; мучнистой росы, септориоза, бурой ржавчины (при слабом развитии заболевания);
- на ячмене яровом – против гельминтоспориозной корневой гнили, фузариозной корневой гнили, мучнистой росы (при слабом развитии болезни), темно-бурой пятнистости, карликовой ржавчины, линейной (стеблевой) ржавчины, сетчатой пятнистости, полосатой пятнистости;
- на томатах защищенного грунта – против фузариозной корневой гнили, серой гнили, фитофтороза (при слабом развитии болезни);
- на огурцах защищенного грунта – против фузариозной корневой гнили, пероноспороза[2].
Токсикологические свойства и характеристики
Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 – малотоксичен, острая пероральная токсичность для крыс и мышей: LD50 > 5000 мг/кг, не патогенен и не токсичен для полезной энтомофауны[3].
Раздражающее действие
на кожу крыс при однократной аппликации не обнаружено[3].Раздражающее действие на глаза кроликов при однократной аппликации не обнаружено[3].
Нормирование остаточных количеств
препарата в продукции для бактериальных и грибных препаратов не требуется поскольку их действующие вещества и в частности Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 не способно проникать внутрь растений и легко смывается с поверхности съедобных частей растений[1][4].Класс опасности
. Фунгицид Фитотрикс, Ж с действующим веществом Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 относят к четвертому классу опасности по отношению к человеку и млекопитающим (малоопасные вещества) и третьему классу опасности по отношению к пчелам (малоопасные вещества)[2].Производство и хранение
Производство
. Посевной материал для получения культуры Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 выращивают методом глубинного культивирования на питательной среде Чапека следующего состава (г/л): глюкоза – 30 (г/л); NaNO3 – 3 (г/л); K2HPO4 – 1 (г/л); MgSO4 х 7H2О – 0,5 (г/л); KCl – 0, 5(г/л); FeSO4 х 7H2O – 0,01(г/л); агар-агар – 15 (г/л); Н2О – остальное[3].Культивирование происходит при температуре +28ºC, в темноте, в течение 168 часов (7 суток). По окончании указанного срока споры штамма смывают с поверхности колоний дистиллированной водой. Полученную суспензию разбавляют до содержания 106 спор/мл и в дальнейшем используют как инокулят для засева глубинных культур[3].
Биосинтез комплекса биологически активных соединений проводится путем засева, полученного инокулята в стерильной природной экспериментальной среде с экстрактом ржаных пентозанов следующего состава: растворенные пентозаны – 0,2%; белок – 0,5%; (NH4)2SO4 – 0,5%. Засев проводится в колбы, содержащие по 100 мл среды. Культуры выращиваются в течение 72–120 часов или 3–5 суток на лабораторных качалках. Интенсивность качания 200 об/мин при температуре + 28ºC и pH 6,0. Клетки отделяют путем центрифунгирования. Полученные пробы исследуют, хранят и используют по целевому назначению[3].
Хранение
. Trichoderma Asperellum М18 штамм ВКПМ F-1395 хранят в форме конидиальных спор на среде Чапека с добавлением глицерина 10-20%-го, при температуре минус 70°C[3].2. Государственный каталог пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации, 2024 год. Министерство сельского хозяйства Российской Федерации (Минсельхоз России)
3. Патент RU2740318C1 Штамм Trichoderma asperellum F-1395 – продуцент гидролитического комплекса. Авторы: Алимова Фарида Кашифовна (RU), Ибатуллина Римма Петровна (RU), Тимербулатова Лейсан Маратовна (RU). Патентообладатель(и): федеральное государственное автономное Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственный институт "Биопрепараты" (ООО "НПИ"Биопрепараты") (RU). Дата начала отсчета срока действия патента: 26.03.2020.Дата регистрации: 13.01.2021.
4. Санитарные правила и нормы 1.2.3685-21 «Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания»
5. Shinde R.S., Haghi A.K. (ed.) Modern Green Chemistry and Heterocyclic Compounds: Molecular Design, Synthesis, and Biological Evaluation Apple Academic Press, Inc., 2020. — 323 p. — ISBN: 978-1-77188-832-5. — (Innovations in Physical Chemistry: Monograph Series)
7. https://www.frac.info
Пестициды, содержащие Trichoderma asperellum м18 штамм вкпм f-1395
фунгициды, ДВ: Trichoderma asperellum, штамм М18 ВКПМ F-1395 (титр не менее 109 КОЕ/мл)
Рег. номер: 1166-02-3926-1 до 27.12.2032 г. 4/3
(c) Справочник AgroXXI