Постановка диагноза – это установление типа болезни, его характера (инфекционное или неинфекционное), причины, возбудителя заболевания и выбор соответствующих мер борьбы.На данном этапе развития науки имеются несколько методов диагностики: макроскопический (патографический), микроскопический, микологический, химический, физический, молекулярный. Наиболее прогрессивной является молекулярная диагностика.

Макроскопический (патографический, визуальный) метод диагностики

Макроскопический метод диагностики – позволяет ставить диагноз по видимым невооруженным глазом внешним признакам (симптомам). При необходимости используется незначительное увеличение (лупа, бинокль).

При использовании этого метода для правильной постановки диагноза необходимо:

  • проанализировать большое количество растений, поскольку совокупность всех признаков заболевания встречается не на всех растениях или симптомы не всегда выражены ясно;
  • тщательно осмотреть и оценить состояния больных растений от корней до вершины (точки роста);
  • проанализировать условия местопроизрастания объекта;
  • установить причины, способствовавшие возникновению болезни растения (антропогенные факторы, неблагоприятные погодные условия, поражение другими болезнями, повреждения насекомыми).

Микроскопический метод диагностики

Микроскопический метод диагностики – исследование с помощью микроскопа спороношения возбудителя заболевания или пораженных тканей растения.

Этот метод применяется для установления наличия патогена в тканях больного растения, то есть определения характера заболевания, и определения вида возбудителя болезни.

Метод микроскопирования дает возможность установить наличие характерных признаков спороношения, свойственных тому или иному патогену и с помощью определителя установить его систематическое положение.

Микологический метод диагностики

Микологический метод диагностики – выделение инокулюма патогена из пораженных частей растения, его изоляции и выращивания (культивирования) на подходящей питательной искусственной или естественной среде.

Культивирование патогенов включает три основных этапа:

  • подготовка образцов естественных субстратов (почвы, органов растений, растительных остатков), из которых осуществляют высев на обычные или элективные питательные среды, способные обеспечить развитие одного или группы родственных видов;
  • выделение и получение чистой культуры патогена на питательных средах;
  • пересев чистых культур на дифференциально-диагностические среды для определения их видовой принадлежности.

Физический метод диагностики

Физический метод диагностики – основан на различных свойствах семян, тканей и органов больных и здоровых растений. Органы больных растений исследуются на резонанс, свечение в ультрафиолетовых лучах, цвет клеточного сока, электропроводность, плотность.

В частности, качество семян можно определить по плотности, поскольку у больных и здоровых семян она различна. Скрытую гниль древесины первоначально устанавливают путем выстукивания, поскольку здоровые и фаутные стволы издают разные звуки.

К физическим методам диагностики относится метод идентификации патогена с помощью индикаторного растения – метод индикаторных растений. Он основан на использовании растений-индикаторов, дающих специфичные симптомы, характерные для определенного вида возбудителя болезни. Метод индикаторных растений широко используется для идентификации вирусных, вироидных, фитоплазменных заболеваний.

Молекулярные методы диагностики

Молекулярные методы диагностики – комплекс методов молекулярной детекции фитопатогенов, позволяющие провести точную диагностику на любой стадии развития заболевания.

Различают три группы методов:

  1. Первая группа методов основана на выявлении специфичных химических соединений (маркерных молекул) для конкретного патогенна. В качестве маркерных молекул используются жирные кислоты, хинин, эргостерин. Наличие метаболитов выявляется с помощью хроматографии.
  2. Вторая группа методов – спектр приемов иммунной диагностики. Эти методы сводятся к формированию в образце комплексов «антигенантитело» и последующей визуализации полученных комплексов. Для визуализации применяют различные способы: фотометрия, флуореметрия, микроскопия иммунопреципитатов.
  3. Третья группа методов основывается на различных вариантах протекания полимеразной цепной реакции (ПРЦ). Маркерные последовательности ДНК возбудителей болезни амплифицируются и визуализируются с помощью флуореметрии, электрофореза в ходе «ПЦР в реальном времени». Важное преимущество этой группы методов – возможность установления наличия и определения вида патогена даже при его незначительном (следовом) количестве.

Большинство методов молекулярной диагностики характеризуются быстротой и простотой использования, позволяющей проводить исследования в условиях передвижных мини-лабораторий. На основе методов молекулярной диагностики выпускаются различные коммерческие наборы для выявления патогенов – диагностикумы.

(c) Справочник AgroXXI