Развитие молекулярной биологии привело к разработке специфичных, чувствительных и быстрых методов диагностики возбудителей болезней растений. Существенное достоинство молекулярно-биологических методов над иммунодиагностикой вирозов – анализ генетической информации. Поскольку он отражает наиболее консервативные свойства патогена.

Группы методов молекулярно-биологической диагностики

Методы молекулярно-биологической диагностики делят на две группы:

  1. Методы гибридизации нуклеиновых кислот с молекулярными зондами, представляющими относительно короткие последовательности ДНК или РНК.
  2. Методы, основанные на полимеразной цепной реакции (ПРЦ), амплифицирующей фрагменты нуклеиновых кислот.

Методики с применением гибридизации появились раньше методов полимеразной цепной реакции и использовались альтернативно ПРЦ. На сегодняшний день эти методы часто используют совместно, дополняя друг друга. Во многих случаях их объединение усиливает диагностический потенциал ПРЦ. Выбор версии метода зависит от того, является ли исследуемая нуклеотидная последовательность известной или же она неизвестна частично или полностью.

Применение методов молекулярно-биологической диагностики

Применение молекулярно-биологических технологий в целях диагностики позволяет преодолеть многие недостатки прочих методов диагностики. А именно:

  • недостаточную специфичность, проявляющуюся в виде перекрестных реакций и приводящую к ложно положительным результатам;
  • недостаточную чувствительность, имеющую место при низкой концентрации патогена, как в случаях с латентной семенной инфекцией;
  • низкую иммуногенность вирусов, обусловленную специфической пространственной структурой белка оболочки вирусов;
  • снять задачу получение антител против вироидов, не имеющих в своем составе белка.

Кроме того, отдельные методы молекулярно-биологической диагностики фитопатогенов позволяют проводить их быструю идентификацию.

Молекулярно-биологическая диагностика находит свое применение в различных областях фитопатологии, ее используют:

  • для генетической характеристики видов, специализированных рас, форм, штаммов и изолятов;
  • для изучения структуры популяции патогенных видов;
  • при исследованиях устойчивости растений к заболеваниям – для идентификации генов устойчивости в растениях и генов, кодирующих у патогенов эффекторы, преодолевающие эти гены;
  • при изучении ранних стадий взаимодействия паразитарных организмов и вредителей с растениями-хозяевами, процессов токсигенеза.

(c) Справочник AgroXXI